將共聚焦與光片顯微成像技術相結合，探索新應用領域
徠卡顯微系統采用獨特的設計方法，使您可以在一個系統中進行共聚焦和光片成像， 實現柔和的單平面照明。 我們的數字光片系統(DLS)采用垂直設計，可以集成到 STELLARIS 5 和 STELLARIS 8 系統中，也可以作為兩種系統的升級。 這樣，您就可以受益于完整功能的共聚焦和易于使用的光片顯微鏡， 從而能夠進行更多樣化的研究。
圖像： 四日齡的斑馬魚胚胎拼接圖像，已標記的內皮細胞。 圖像由法國伊爾基希-格拉芬斯塔登遺傳與分子細胞生物學研究所 (IGBMC) 影像中心 Elvire Guiot 博士提供。
讓您能夠進行更多樣化的研究
在STELLARIS 5或STELLARIS 8系統中添加DLS可令您的研究更加多樣化，使您能夠通過簡單的樣本處理和多位置實驗輕松進行不同類型的三維樣本成像。
DLS模塊專為改進活細胞成像應用而設計，通過單平面照明以及sCMOS攝像頭進行快速成像，可提高細胞活性。 除了活體樣本外，DLS還可以對經過透明化處理的樣本成像，為實現您的研究目標提供更大的靈活性。
低光毒性和三維樣本成像： 黑腹果蠅六小時發育過程。 探針： 光敏RFP。 三維渲染。 150 μm Z軸層掃圖像，30秒/完整層掃。
實施并進行長時間的觀察記錄
成像需要光照，但光照過強會損傷細胞。 光片顯微鏡是迄今為止最溫和的成像方法，因為它可以減少光毒性和光漂白造成的總體光損傷。 這可以提高樣本的活性。 光片成像尤其有利于發育生物學的研究。 弱光照明與高速采集相結合，讓您可以長期跟蹤果蠅胚胎等發育中的敏感生物體，并以三維方式實時了解組織和器官的形成過程。
光片成像原理
光片顯微鏡對樣本進行單平面照明，非常適合敏感樣本或快速生物過程的成像。
由于不存在離焦激發，可將光毒性的影響局限于焦平面。 此外，通過在光片中移動樣本，您可自動獲得光學切片，并可對樣本進行三維成像。
三維培養的乳腺上皮微球體7.5小時延時錄像。 數據由BioQuant/德國海德堡 DKFZ 的智能成像研究小組 (B. Eismann/C. Conrad) 提供
探索三維細胞培養物，一次觀察多個位置
類器官或球狀體等三維細胞培養物的有效成像構成一系列的新挑戰，因為它們包含很大的體積。 類器官既可以被固定、進行免疫標記、使用透明化技術進行研究，也可以利用活體研究其動態過程。 由于定義了工作流程，使用DLS研究這些樣本非常簡單，并且可以提供關于細胞和分子過程的重要信息。 DLS非常適合滿足透明細胞和活細胞制備的需求，讓您能夠更好地研究三維細胞培養物，這類培養物能夠提供比粘附細胞的二維細胞培養物更具生理意義的研究條件。
使用數字光片顯微鏡探索完整的 3D 細胞生物學工作流程 。
適用于活體樣本和經透明化處理樣本的光片系統
由于生物組織的不透明性，深層組織顯微成像非常困難。 這正是越來越多的組織透明化方法發揮作用的地方，但這對于許多成像系統而言是一大挑戰。
DLS模塊不僅可以提供出色的活體樣本成像結果，而且可以對經過各種不同透明技術處理的樣本進行成像。 使用DLS，您可以在多個檢測物鏡與安裝架之間進行選擇，以呈現經過透明化處理的組織和生物體內的結構細節。
視頻采集條件：
● 檢測物鏡 HC APO L10x/0.30 W DLS
● 圖像大?。?1.39mm x 2.04mm（2x3 拼接）
● Z軸：1.5mm厚度（2um步長，745幀）
● 采集時間：5 分 37 秒
● 激發：514納米
● 發射： LP514 nm長通，6 ms曝光時間
本例說明了共聚焦與DLS相結合的優勢。 轉基因斑馬魚胚胎被標記，以呈現免疫反應中的巨噬細胞。 為了研究它們受傷時的行為，使用共聚焦激光制造一個傷口（箭頭位置），然后錄制了延時視頻。 該視頻顯示了傷口觸發愈合過程后，被激活細胞正在向傷口遷移的動態反應。 在這種情況下，切換到DLS可以對斑馬魚進行溫和的活細胞成像。
從許多其他應用中獲益
我們的光片模塊不僅僅是共聚焦顯微鏡的一個附加功能模塊。 STELLARIS與DLS相輔相成，為您的研究擴大了選擇范圍。 例如，您可以使用共聚焦技術操控樣本，然后使用DLS成像。
只需在LAS X軟件中切換共聚焦模式和光片模式，即可輕松實現這一點。 這樣，光轉換或劃痕實驗以及后續的長時間溫和觀察都將變得容易和方便。
熟悉的樣本制備
DLS采用垂直實驗設置，因此您可以繼續采用自己熟悉的樣本制備方式。 樣本裝在傳統的玻璃底有蓋培養皿中，可直接操作。 您甚至還可以在多位置實驗中篩選多個樣本。 利用共聚焦電動載物臺可在一個實驗設置中對多個樣本成像。 WY的先決條件是什么？ 樣本每側需要留出放置TwinFlect反光鏡的空間。
DLS的樣本制備。 樣本嵌入玻璃底培養皿的瓊脂中。 必須去除多余的瓊脂，以便為TwinFlect反光鏡騰出空間。
以工作流程為導向的軟件設計
LAS X軟件可逐步指導用戶完成數據記錄和評估。以工作流程為導向的設計可幫助您更高效地使用儀器。 便捷的校準程序可精確確定光片。
設計中采用雙側照亮樣本方法：兩塊TwinFlect反光鏡相對放置，均可被掃描器瞄準，從而消除陰暗區域。 要在較大視場中獲得清晰圖像，可以使用LAS X軟件中LightSheet Wizard的在線或離線融合選項合并這兩張圖像。
您可根據自己的需求通過LAS X定制該軟件。 LAS X 3D Visualization模塊以直觀裁剪、快速渲染和立體顯示等新方法交互處理三維數據。 區塊掃描實驗可使您觀察大面積區域。 “標記和查找”實驗可使您在多位置的設置中觀察多個感興趣的區域。
優質光學元件
適合廣泛應用領域的優質物鏡是 徠卡顯微系統的標志性特征之一。 垂直轉動光片的系統核心由 物鏡和 TwinFlect 反光鏡裝置構成。
您可以根據實驗的要求，通過選擇不同的照明物鏡來形成光片。
要呈現最微小的細節、獲得更大的視場 或匹配成像介質的折射率，您可以從越來越多的選件中挑選ZJ的檢測物鏡。
| 物鏡 | 活細胞成像 | 糖基透明化處理試劑 | 兼容BAAB透明化處理 |
| FLUOTAR L 25x/0.95 W | 是 | 否 | 否 |
| APO L 20x/0.5 W | 是 | 否 | 否 |
| Fluotar L 16x/0.6 IMM | 是 | 是 | 是 |
| APO L 10x/0.3 | 是 | 是 | 否 |
| 5x/0.15 IMM | 是 | 是 | 是 |
